【摘 要】
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目的探究Homer1a对机械性损伤神经元的保护作用及具体作用机制。方法分离并培养大鼠脑皮层神经细胞,随机分为:对照组、模型组、空载体组1(NC-V1)、Exp-Homer1a组、空载体组2(
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属武汉中西医结合医院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.81601076)
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目的探究Homer1a对机械性损伤神经元的保护作用及具体作用机制。方法分离并培养大鼠脑皮层神经细胞,随机分为:对照组、模型组、空载体组1(NC-V1)、Exp-Homer1a组、空载体组2(NC-V2)、sh-Hormer1a-2组、模型+SCH组和sh-Hormer1a-2+SCH组。构建机械性损伤细胞模型,分别感染Homer1a过表达或干扰慢病毒载体(ExpHomer1a或sh-Hormer1a),并用细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)抑制剂SCH772984(SCH)处理细胞。采用MTT法检测各组神经元的存活情况,使用乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)测试盒测定细胞上清LDH含量,Western blot检测Hormer1a、cleaved-Caspase-3、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果与对照组比较,机械性损伤神经元存活率显著降低,LDH释放水平和凋亡率增加,且Homer1a mRNA和蛋白表达水平显著升高,cleaved-Caspase-3和p-ERK1/2表达增加(均P<0.05);与模型组比较,上调Homer1a可促进机械性损伤神经元存活,降低LDH释放量和细胞凋亡率,抑制cleaved-Caspase-3和p-ERK1/2表达(均P<0.05);与sh-Homer1a-2组比较,sh-Homer1a-2+SCH组细胞存活率明显升高,凋亡率显著下降(均P<0.05)。结论Homer1a可能通过抑制ERK1/2信号通路的活化促进机械性损伤神经元的存活,抑制细胞凋亡。
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