观察脓毒症（sepsis）患者血浆白细胞介素-35（IL-35）的变化，探讨IL-35对脓毒症患者CD4⁺和CD8⁺T细胞的调控作用。

采用前瞻性研究方法，选择41例脓毒症患者和19例健康对照者。于就诊本院后1 h内采血，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血浆IL-35水平，流式细胞术检测CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺T细胞计数，分析IL-35、T细胞计数与序贯器官衰竭评分（sequential organ failure assessment, SOFA）的相关性。分选脓毒症患者外周血CD4⁺与CD8⁺T细胞，使用重组人IL-35刺激培养48 h，实时定量PCR法检测CD4⁺T细胞中T-bet、GATA-3、FoxP3、RORγt mRNA以及CD8⁺T细胞中穿溶素、颗粒酶B、FasL mRNA相对表达量；ELISA法检测CD4⁺T细胞培养上清中的干扰素-γ（IFN-γ）、IL-4、IL-10、IL-17水平和CD8⁺T细胞培养上清中IFN-γ和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。比较IL-35刺激前后转录因子和细胞因子的变化。

脓毒症患者血浆IL-35水平高于对照者[（76.76±10.33） pg/mL vs （27.53±8.31） pg/mL，P<0.01]，但与SOFA评分无显著相关性（r=0.172，P=0.281）。脓毒症死亡组（n=11）血浆IL-35水平高于存活组（n=30）[（83.18±6.48） pg/mL vs （74.40±10.55） pg/mL，P=0.014]，对两组血浆IL-35水平进行ROC曲线分析，曲线下面积为0.770，P=0.009，预测价值较好。CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺T细胞计数在脓毒症和对照者之间、在死亡组和存活组之间的差异均无统计学意义（均P>0.05），但与SOFA评分呈显著负相关（P<0.01）。使用重组人IL-35刺激CD4⁺T细胞后，Th1转录因子T-bet和Th17转录因子RORγt mRNA降低（P<0.01），而调节性T细胞转录因子FoxP3 mRNA升高（P<0.01），但Th2转录因子GATA-3 mRNA无显著变化（P=0.745）；IL-35刺激后CD4⁺T细胞分泌IFN-γ和IL-17的水平降低（P<0.05），而IL-10水平提升（P<0.01），但IL-4水平无显著变化（P=0.536）。使用重组人IL-35刺激CD8⁺T细胞后，穿孔素和颗粒酶B mRNA降低（P<0.01），FasL mRNA无显著变化（P=0.795），分泌IFN-γ和TNF-α的水平亦降低（P<0.05）。

血浆IL-35水平升高对脓毒症患者的预后不佳有重要提示意义。IL-35抑制脓毒症患者CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞活性，可能参与脓毒症的发病过程。