【摘 要】
：
目的 探讨滑膜巨噬细胞焦亡对背根神经节神经元细胞（DRG）膜上瞬时受体电位TRPA1的影响及三色散的干预作用。方法 提取ICR小鼠滑膜巨噬细胞，用1μg/mL的脂多糖（LPS）以模拟KOA的炎症微环境；采用CCK-8法检测三色散水提物冻干粉对滑膜巨噬细胞的增殖活性，确定对细胞无毒性的干预浓度；滑膜巨噬细胞分组为正常组、LPS组、三色散组，Western blot法检测滑膜巨噬细胞焦亡相关NLRP3
【机 构】
：
南京中医药大学附属医院江苏省中医院
【基金项目】
：
国家自然科学基金（81774334）； 江苏省中医药领军人才项目（SLJ0207）;江苏省中医药科技发展专项（2020ZX12）；
论文部分内容阅读
目的 探讨滑膜巨噬细胞焦亡对背根神经节神经元细胞（DRG）膜上瞬时受体电位TRPA1的影响及三色散的干预作用。方法 提取ICR小鼠滑膜巨噬细胞，用1μg/mL的脂多糖（LPS）以模拟KOA的炎症微环境；采用CCK-8法检测三色散水提物冻干粉对滑膜巨噬细胞的增殖活性，确定对细胞无毒性的干预浓度；滑膜巨噬细胞分组为正常组、LPS组、三色散组，Western blot法检测滑膜巨噬细胞焦亡相关NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达；qRT-PCR检测滑膜巨噬细胞NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18基因表达；ELISA检测炎症细胞因子（IL-1β和IL-18）水平；提取ICR小鼠DRG细胞，将上述三组细胞上清加入DRG细胞中，另增设一组加入LPS及TRPA1抑制剂，DRG分组为正常上清干预组（A组）、LPS上清干预组（B组）、三色散上清干预组（C组）,LPS+TRPA1抑制剂组（D组）;βⅢ-tubulin及GFAP免疫荧光鉴定提取的DRG神经元细胞；Western blot法及qRT-PCR检测TRPA1蛋白及基因表达；ELISA检测疼痛因子（CGRP和SP）水平；实时荧光钙成像观察各组DRG神经元细胞钙离子内流情况。结果 确定100μg/mL三色散水提冻干粉对滑膜巨噬细胞无明显细胞毒性；LPS组NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达显著高于正常组，低于三色散组（P＜0.05）;LPS组NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18基因表达显著高于正常组，低于三色散组（P＜0.05）;LPS组细胞上清中IL-1β和IL-18表达量显著高于正常组，低于三色散组（P＜0.05）;βⅢ-tubulin及GFAP免疫荧光显示提取的DRG神经元细胞胞体呈圆形或椭圆形，可见神经元之间的轴突呈大量增加，形成稀疏网络状结构；三色散水提冻干粉干预后可抑制B组瞬时受体电位TRPA1蛋白及基因表达水平的上升（P＜0.05）,降低B组细胞上清中CGRP和SP表达量；实时荧光钙成像分别观察20、40和60 s的荧光强度发现：B组荧光强度较A组增加（P＜0.05）,C组及D组荧光强度较B组降低（P＜0.05）。结论 滑膜巨噬细胞焦亡激活DRG膜上TRPA1离子通道参与KOA疼痛反应，而三色散可以抑制滑膜巨噬细胞焦亡及减少DRG细胞TRPA1离子通道上Ca2+内流，发挥减轻KOA疼痛的功效。
其他文献
目的:探索体内直接诱导巨噬细胞M2型极化对骨关节炎的影响;探索麝香酮对骨髓来源巨噬细胞的调控作用;研究麝香酮刺激巨噬细胞M2型极化治疗膝骨关节炎的作用,为麝香酮的临床应用提供理论基础。方法:1.巨噬细胞M2极化治疗膝骨关节炎的实验研究将48只10周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为六组,假手术组（Sham组）、Sham+LUC组、LUC组、IL4组、IL13组、IL4+IL13组。Sham组和Sha
如何更好地开展大学生就业指导工作已成为高校毕业生就业工作的一个难题。互联网的快速发展使人们获取信息日益便捷，为大学生就业指导提供了新的思路。基于此，文章对互联网背景下大学生的就业指导路径进行了深入探索，以期为解决当前大学生就业难现象提供一定的帮助。
＜正＞发展是党执政兴国的第一要务。没有坚实的物质技术基础，就不可能全面建成社会主义现代化强国。习近平总书记在党的二十大报告中强调，“高质量发展是全面建设社会主义现代化国家的首要任务”。学习贯彻党的二十大精神，就要深刻理解发展质量的全局和长远意义，把发展质量摆在更突出的位置，认真贯彻落实推动高质量发展的战略部署，不断开创经济社会发展新局面。
从诠释史和诠释方法相统一的视角言,20世纪的中国传统哲学并未"断裂",而是化身于诸多的诠释话语中。以唯物辩证法的内涵、立场及结构为参照和标准的唯物主义认知范式是解读中国传统哲学的重要诠释范式之一。由此出发,以"正言若反"的话语图式为题眼和钥匙构成诸多学者探析《老子》辩证法思想的基本范式。但过度使用唯物认知范式会在内容、意义和结构上对理解《老子》哲学思想造成一定的局限性,原因不仅在于《老子》哲学与马
近年来，随着高发病率和死亡率病毒性疾病的频发，越来越意识到抗病毒药物研究的重要性。中药含有结构多样化的生物活性物质，为药物研究提供了重要的模板结构。因其具有新颖性、多组分、多靶点的特点，而成为新药开发的宝贵来源。中药有效成分的抗病毒作用机制包括抑制病毒复制、阻断病毒与受体结合、直接杀灭病毒、增强免疫系统、抑制细胞因子/趋化因子的反应等，以抗病毒作用机制为依据对具有抗病毒活性成分的中药有效成分进行综
目的:探讨我国压力性损伤护理研究的发展现状、研究热点及趋势，为开展相关研究提供参考依据。方法:计算机检索中国知网（CNKI）中2000年1月1日—2020年12月31日有关压力性损伤护理的相关文献，运用CiteSpace软件对其进行可视化分析。结果:最终纳入文献1 341篇，压力性损伤护理相关文献的发文量总体呈上升趋势，蒋琪霞发表23篇，居首位。华中科技大学同济医学院附属协和医院发文量最多，发表了
债务人不履行或不知要履行税收债务情况下，第三人以债务人名义代为偿还税收债权的法律认定，由于债务人主观上缺乏与第三人形成履行合意的基础，由第三人履行与并存的债务承担所需要件无法得到满足，免责的债务承担则因无法得出债权人同意的成立基础及与税收法定原则不相契合而被排除。《民法典》第524条新增的第三人代为履行条款，在解释上可以较好地适用于代为偿还税收债权行为，第三人获得的求偿权在破产清算程序中应按照普通
化工企业近年来发展持续增速,新技术、新产品、新项目不断涌入市场,而企业的各项工作都离不开资金支持,加之化工企业固定资产资金占用比例较大。所以,化工企业想要实现市场的持续拓展及综合竞争实力的不断提升,资金需求是否得到充分满足就成为影响化工企业持续发展的关键性因素。本文从化工企业当前融资现状及存在的问题入手,结合行业发展特点提出若干利于化工企业拓展融资渠道优化资本结构的参考措施。