基因打靶载体选择标记盒的构建及表达

来源 :扬州大学学报：农业与生命科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dairyboy126

【摘要】

：

为构建山羊乳腺基因打靶载体的选择标记盒,将loxP位点分别引入正、反向引物,以含新霉素磷酸转移酶(neo)基因的质粒pTarget为模板,用高保真聚合酶链反应(PCR)扩增得loxP-neo-l

【作者】

：

张磊陈刚孙怀昌

【机构】

：

扬州大学畜牧兽医学院动物医学系

【出处】

：

扬州大学学报：农业与生命科学版

【发表日期】

：

2002年2期

【关键词】

：

基因打靶基因打靶载体选择标记盒聚合酶链反应重组表达 Loxp-neo-loxP 转基因动物 gene targeting vectors selecti

【基金项目】

：

教育部高校骨干教师资助计划，江苏省新世纪学科带头人培养基金

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为构建山羊乳腺基因打靶载体的选择标记盒,将loxP位点分别引入正、反向引物,以含新霉素磷酸转移酶(neo)基因的质粒pTarget为模板,用高保真聚合酶链反应(PCR)扩增得loxP-neo-loxP选择标记盒.将PCR产物克隆到pGEM-T载体后进行的序列分析结果显示,引入的loxP位点及扩增后的neo基因序列均是正确的.将此选择标记盒克隆到不含neo基因的真核表达载体ΔpTarget后转染COS-1细胞,经过G418筛选获得药物抗性细胞克隆.再将此选择标记盒克隆到山羊β-乳球蛋白基因打靶载体并转染山羊

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