目的 分离培养内毒素耐受状态小鼠脾脏CD11clowCD45 RBhigh DC并探讨其生物学特性.方法 12只体质量为20～25 g的健康BALB/c小鼠,采用随机数字表法分成两组,每组6只.正常对照组小鼠腹腔注射0.9％氯化钠溶液0.2 mL;内毒素耐受组小鼠以0.1 μg脂多糖腹腔注射,每日1次,连续注射5d建立内毒素耐受小鼠模型.免疫磁珠分选法分选正常对照组和内毒素耐受小鼠脾脏CD11clowCD45 RBhigh DC,流式细胞术检测细胞表型,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测T淋巴细胞增殖抑制率,ELISA法检测上清液中IL-10和IL-12表达量.样本均数比较采用单因素方差分析,Levene法检验方差齐性,方差齐时采用LSD-t检验,方差不齐时采用Dunnett T3检验.结果 正常对照组小鼠CD11clowCD45RBhigh DC浓度为30％,细胞计数为(5.30±0.12)×105个;内毒素耐受组CD11clowCD45 RBhigh DC浓度为80％,细胞计数为(1.20±0.13)×106个,两组差异有统计学意义(t=3.23,P＜0.01).两组细胞形态上未见明显差别.内毒素耐受小鼠脾脏CD11clowCD45RBhigh DC表面标志主要组织相容性抗原(MHC)-Ⅱ、CD40、CD80的表达均较正常对照组明显降低.内毒素耐受组在细胞浓度为1∶10、1∶50、1∶100时细胞增殖率均明显低于正常对照组,差异均有统计学意义(t值分别为1.36、2.49和1.88,均P＜0.01).内毒素耐受组各浓度细胞与正常对照组比较,IL-10分泌量显著增加,差异有统计学意义(t值分别为13.63、13.45和9.31,均P＜0.01);IL-12分泌量明显下降,差异有统计学意义(t值分别为2.62、2.74和2.99,均P＜0.05).结论 内毒素耐受小鼠脾脏CD 11clowCD45 RBhigh DC具有较弱的抗原提呈能力及刺激异基因淋巴细胞增殖能力。
内毒素耐受小鼠脾脏CD11clow CD45RBhigh树突状细胞培养与生物学特性鉴定
【摘 要】
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目的 分离培养内毒素耐受状态小鼠脾脏CD11clowCD45 RBhigh DC并探讨其生物学特性.方法 12只体质量为20～25 g的健康BALB/c小鼠,采用随机数字表法分成两组,每组6只.正常对照组小鼠腹腔注射0.9％氯化钠溶液0.2 mL;内毒素耐受组小鼠以0.1 μg脂多糖腹腔注射,每日1次,连续注射5d建立内毒素耐受小鼠模型.免疫磁珠分选法分选正常对照组和内毒素耐受小鼠脾脏CD11cl
【机 构】
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杭州市萧山区第一人民医院感染科311200,325000温州医科大学附属第一医院感染科,325000温州医科大学附属第一医院感染科,325000温州医科大学附属第一医院感染科,325000温州医科大学
【出 处】
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中华传染病杂志
【发表日期】
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2014年32期
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