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针对猪胸膜肺炎放线杆菌种特异性基因ApxⅣ和血清1、3、5、7型的特异Cps基因设计5对引物,通过扩增条件的优化,建立了猪胸膜肺炎放线杆菌及血清1、3、5、7型的五重PCR检测方法.特异性试验显示,对血清1～15型参考菌株均扩增出相应的预期目的条带,对6种引起猪发病的主要病原菌均未扩增出任何条带.敏感性试验表明,对各血清型细菌纯培物的敏感性皆为103 CFU/mL;对1、5型感染样品的敏感性为104 CFU/g,对3、7型感染样品的敏感性为103 CFU/g.可在4.5 h左右直接从病猪肺脏中得到检测结果.方法的建立为相关临床病例快速诊断及流行病学调查提供了有效的技术支持.