枸杞多糖对高糖干预的人晶状体上皮细胞中SIRT1及SIRT6表达的影响

来源 :宁夏医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hahanikan
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目的 研究枸杞多糖(LBP)对高糖干预的人晶状体上皮(HLEB3)细胞中沉默信息调节因子1(SIRT1)及沉默信息调节因子6(SIRT6)表达水平的影响。方法 将对数生长期的HLEB3细胞随机分为对照组(CON组,5.5 mmol·L-1)、高糖组(HG组,55.5 mmol·L-1)、HG+12.5 mg·L-1LBP组、HG+25 mg·L-1LBP组、HG+50 mg·L-1LBP组,培养24 h后,分别用相应培养基干预48 h,用显微镜观察各组细胞的形态及密度变化;采用CCK-8试剂盒检测各组细胞的存活率;采用免疫荧光法对各组细胞中SIRT1和SIRT6蛋白进行定位检测;采用Western blot法测定各组细胞中SIRT1与SIRT6蛋白的表达水平。结果 光镜下观察发现,CON组HLEB3细胞主要呈梭形贴壁生长,HG组细胞形态呈不规则状,细胞密度降低;与HG组相比,HG+12.5 mg·L-1LBP组、HG+25 mg·L-1LBP组、HG+50 mg·L-1LBP组细胞密度依次增加。CCK-8检测结果显示,与CON组相比,HG组HLEB3细胞活性降低(P<0.05);与HG组相比,HG+50 mg·L-1LBP组HLEB3细胞活性增加(P<0.05)。免疫荧光结果显示,HLEB3细胞中SIRT1蛋白主要在细胞核中表达,细胞质中有少量表达;SIRT6蛋白表达定位在细胞核。Western blot结果显示,与CON组相比,HG组HLEB3细胞中SIRT1和SIRT6蛋白表达均下调(P均<0.05);与HG组相比,HG+50 mg·L-1LBP组HLEB3细胞中SIRT1和SIRT6蛋白表达均上调(P均<0.01)。结论 LBP可以增加高糖干预的HLEB3细胞的增殖活性,并上调SIRT1和SIRT6蛋白的表达。
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