HPLC波长切换法同时测定清热解毒颗粒中8个成分的含量

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目的:建立高效液相色谱法同时测定清热解毒颗粒中绿原酸、栀子苷、木犀草苷、连翘苷、黄芩苷、木犀草素、黄芩素、汉黄芩素共8个成分的含量。方法:采用Phenomenex Luna 5μ-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1 m L·min-1,检测波长326 nm(0~26 min,测定绿原酸)、238 nm(26~35 min,测定栀子苷)、350 nm(35~44 min,测定木犀草苷)、230 nm(44~48 min,测定连翘苷)、276 nm(48~53 min,测定黄芩苷)、350nm(53~60 min,测定木犀草素)、276 nm(60~85 min,测定黄芩素、汉黄芩素)。结果:各待测组分分离度良好;绿原酸、栀子苷、木犀草苷、连翘苷、黄芩苷、木犀草素、黄芩素、汉黄芩素8个成分的进样量分别在0.041 3~0.413μg(r=0.999 6),0.034 0~0.340μg(r=0.999 9),0.037 1~0.371μg(r=0.999 5),0.026 4~0.264μg(r=0.999 3),0.196 0~1.960μg(r=0.999 8),0.010 8~0.108μg(r=0.999 2),0.021 2~0.212μg(r=0.999 2),0.005 7~0.057μg(r=0.999 0)与峰面积呈良好的线性关系;加样回收率(n=6)分别为98.4%(RSD=1.6%)、99.2%(RSD=1.4%)、98.5%(RSD=1.7%)、100.7%(RSD=2.0%)、99.0%(RSD=0.9%)、98.8%(RSD=1.9%)、98.1%(RSD=1.8%)、99.9%(RSD=1.3%)。经HPLC测定,3批样品中8个成分的含量分别为绿原酸0.326~0.775 mg·g-1,栀子苷0.167~0.581 mg·g-1,木犀草苷0.093~0.216 mg·g-1,连翘苷0.107~0.304 mg·g-1,黄芩苷1.574~3.810 mg·g-1,木犀草素0.092~0.114 mg·g-1,黄芩素0.175~0.625 mg·g-1,汉黄芩素0.042~0.188 mg·g-1。结论:经方法学验证,本方法简单、快速、灵敏、准确,可用于清热解毒颗粒中绿原酸、栀子苷、木犀草苷、连翘苷、黄芩苷、木犀草素、黄芩素、汉黄芩素8个成分的含量测定。
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