【摘 要】
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为获得适用于高通量测序的高质量花生叶片DNA,本方法取第三对真叶为实验材料,设计烧制圆球状枪头和离心管装置代替研钵研磨,并在CTAB法的基础上在杂质沉淀前快速分离DNA等简
【机 构】
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中国海洋大学食品科学与工程学院; 山东省花生研究所;
【基金项目】
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中央引导地方科技发展专项;泰山学者特聘专家(ts201712080);山东省自然科学基金(ZR2017BC082);山东省农业良种工程(2017LZN033,2017LZGC003);山东省现代农业产业技术体系花生遗传育种岗位(SDAIT-04-02);山东省农业科学院农业科技创新工程(CXGC2016A01)
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为获得适用于高通量测序的高质量花生叶片DNA,本方法取第三对真叶为实验材料,设计烧制圆球状枪头和离心管装置代替研钵研磨,并在CTAB法的基础上在杂质沉淀前快速分离DNA等简化方法提取DNA。琼脂糖凝胶电泳检测结果表明DNA条带清晰、完整性高。经超微量分光光度计检测,DNA浓度范围在104～131 ng/μL,OD260/OD280为1.7～2.0,OD260/OD230大于2.0,说明杂质少,可获得高纯度,高浓度的DNA。此方法与常用的植物基因组DNA提取方法相比,具有成本低、时间短、质量高的优点,可用于基因组重测序、分子生物学技术以及分子标记筛选等后续研究,可提高花生分子育种与筛选工作效率。
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