【摘 要】
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目的建立血管内皮细胞连接蛋白43（connexin43，Cx43）条件性敲除小鼠模型，并对其血管舒张/收缩功能进行检测。方法将8只Cx43flox/flox小鼠与C57BL/6品系野生型（wildtype，WT）小鼠交配，子代小鼠继续与C57BL/6小鼠回交9代进行基因背景转换；再将Cx43flox/+小鼠与血管内皮细胞特异性表达Tie2-Cre重组酶小鼠（以下简称Cre小鼠）交配，获得Tie2-
【机 构】
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陆军军医大学大坪医院野战外科研究部战伤休克与输血研究室
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金项目（81801905）;国家自然科学基金面上项目（82072164）； 重庆市基础研究与前沿探索项目（cstc2018jcyjAX0555）；
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目的建立血管内皮细胞连接蛋白43（connexin43，Cx43）条件性敲除小鼠模型，并对其血管舒张/收缩功能进行检测。方法将8只Cx43flox/flox小鼠与C57BL/6品系野生型（wildtype，WT）小鼠交配，子代小鼠继续与C57BL/6小鼠回交9代进行基因背景转换；再将Cx43flox/+小鼠与血管内皮细胞特异性表达Tie2-Cre重组酶小鼠（以下简称Cre小鼠）交配，获得Tie2-Cre/Cx43flox/+小鼠。利用鼠尾PCR试剂盒进行基因型鉴定，WesternBlot法和免疫荧光法检测小鼠肠系膜上动脉（superiormesentericartery，SMA）中Cx43表达。利用离体张力测定技术检测SMA血管舒张/收缩功能，包括去甲肾上腺素诱导的收缩反应性和乙酰胆碱诱导的舒张反应性。结果PCR电泳和血管蛋白表达检测结果证实Tie2-Cre/Cx43flox/+小鼠成功构建，肠系膜上动脉中Cx43蛋白表达与野生型小鼠相比明显降低（P＜0.01）。与WT小鼠相比，部分敲除血管内皮细胞Cx43后使乙酰胆碱诱导的内皮依赖的血管舒张反应性显著降低（P＜0.01）。结论采用Cx43flox/flox 小鼠与血管内皮细胞特异性表达Tie2-Cre重组酶小鼠成功构建血管内皮细胞条件性敲除Cx43杂合子小鼠，该小鼠的肠系膜上动脉中Cx43表达降低，且舒张反应性明显降低，预期可为研究Cx43及其相关结构在血管功能调节中的作用提供动物模型。
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