【摘 要】
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为纯化黄粉甲抗冻蛋白AFP84a,对已构建的重组大肠埃希菌TBI诱导表达,对诱导温度、初始菌浓度I、PTG浓度及诱导时间等表达条件进行优化后,纯化该重组蛋白。通过分析比较,建立
【机 构】
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新乡医学院生命科学技术系,河南科技学院实验中心,河南师范大学生命科学学院
【基金项目】
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河南省科技攻关资助项目（0224330110）, 河南省动物学重点学科资助项目
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为纯化黄粉甲抗冻蛋白AFP84a,对已构建的重组大肠埃希菌TBI诱导表达,对诱导温度、初始菌浓度I、PTG浓度及诱导时间等表达条件进行优化后,纯化该重组蛋白。通过分析比较,建立了目的蛋白表达的最优条件：温度25℃,初始菌OD600=0.6;IPTG终浓度0.5 mmol/L,时间8 h。SDS-PAGE及Bandscan4.3软件分析表明,融合蛋白含量超过总可溶蛋白的40%。融合蛋白经Amylose柱亲和纯化,Factor Xa酶切,电泳显示获得的目的蛋白呈单一条带。本研究结果为进一步对抗冻蛋白的性质和应
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