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背景：到目前为止已建立了数百个小鼠胚胎干细胞系，一般情况下实验室培养的胚胎干细胞有3个细胞来源，即胚泡内的内细胞群、胚胎生殖嵴的原始生殖细胞和应用克隆技术制造人体胚胎并提取干细胞。目的：尝试用自制的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层分离培养小鼠胚胎干细胞。设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2005—12／2007—09在辽宁医学院完成。材料：妊娠14．5d的孕鼠40只，由辽宁医学院实验动物中心提供。方法：无菌条件下剪开孕鼠子宫壁，取出胚胎，去除头、尾、内脏和四肢后采用胰蛋白酶消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞，经丝