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在研究基质效应的基础上，建立了乙酸乙酯提取，石油醚净化，氘代甲基睾丸酮为内标，甲醇和5 mmol/L乙酸铵（含0．15％甲酸）为流动相，梯度洗脱，高效液相色谱-串联质谱法（HPLC -MS-MS）测定水产品中甲基睾丸酮残留量的方法。在2．0～500 ng/m L浓度范围内，线性良好，R2≥0．999；定量限为5．0μg/K g。空白样品添加标准物质后的回收率在75％～105％之间，相对标准偏差≤10％。该方法前处理简单，可适用于批量水产品中甲基睾丸酮残留量的快速定性定量检测。