GM—CSF工程菌构建及鉴定

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【摘要】

：

采用ＰＣＲ技术，从细胞中克隆粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）并在５′端设计上凝血酶切位点５个组氨酸密码子，起始密码子及ＥＣＯＲＩ酶切点位，在３′端设计上ＢａｍＨＩ酶切位点，将扩增产物酶切后克隆到ＰＢＶ２２０质粒的ＥＣＯＲＩ－ＨｉｎｄⅢ酶切

【作者】

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韩金祥宋长征梁浩张翠王美岭王革

【机构】

：

山东省医科院生物技术中心,中国科学院生物物理研究所

【出处】

：

药物生物技术

【发表日期】

：

1996年4期

【关键词】

：

GM-CSF 基因表达鉴定工程菌 GM-CSF gene expression detection

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采用ＰＣＲ技术，从细胞中克隆粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）并在５′端设计上凝血酶切位点５个组氨酸密码子，起始密码子及ＥＣＯＲＩ酶切点位，在３′端设计上ＢａｍＨＩ酶切位点，将扩增产物酶切后克隆到ＰＢＶ２２０质粒的ＥＣＯＲＩ－ＨｉｎｄⅢ酶切位点，转化大肠杆菌ＤＨ５α筛选阳性重组子（Ｐ＾ＧＭ０９／ＤＨ５α）经细菌形态，菌落形态功生化鉴别均符合要求，在Ｅ．Ｃｏｌｉ中获得高效表达，表达量占体总

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