人源性抗-HBc单链噬菌体抗体库的构建

来源 :中华传染病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guohiahong9999
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目的构建人源性单链噬菌体抗体库,为筛选人源性抗-HBc单链抗体奠定基础.方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和噬菌体表面展示技术,直接从乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)阳性患者淋巴细胞中提取总RNA,逆转录成cDNA;合成全套人抗体可变区引物扩增抗体可变区基因,并将重、轻链可变区基因进行拼接装配成单链抗体(ScFv)基因,重组于噬菌粒载体pHEN1,转化抑制型大肠埃希菌E.coliTG1,以辅助噬菌体援救后,构建成人源性单链噬菌体库.结果成功地构建了人源性抗-HBc单链噬菌体库,库容量达106.结论利用RT-PCR和噬菌体表面展示技术可以成功构建人源性单链抗体库,并达到建库标准,可进一步从中筛选人源性单链抗体.

其他文献
目的探讨三氯乙烯药疹性皮炎患者血清肿瘤坏死因子(TNF-α)和表皮生长因子(EGF)水平及临床意义.方法清晨抽取空腹三氯乙烯药疹性皮炎(DMLT)患者和正常对照人群静脉血液,分离血清,应用放射免疫分析法同时测定血清中TNF-α以及EGF含量.结果39例DMLT患者血清TNF-α含量为(0.278±0.092)ng/L,EGF含量为(6.71±2.28)μg/L,两者各自与对照组[(0.128±0.