【摘 要】
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利用TdR-N2O同步法分别获得P15高表达的MLIK6和表达空载体的MLC2的M期细胞和G1期细胞,3H-TdR掺入结果显示,与对照组细胞MLC2相比,实验组细胞MLIK6从G1期进入S期时间延长2h,并
【机 构】
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北京师范大学生命科学学院细胞增殖与调控生物学教育部重点实验室,首都医科大学细胞遗传教研室
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利用TdR-N2O同步法分别获得P15高表达的MLIK6和表达空载体的MLC2的M期细胞和G1期细胞,3H-TdR掺入结果显示,与对照组细胞MLC2相比,实验组细胞MLIK6从G1期进入S期时间延长2h,并且掺入强度明显减弱,DNA合成被抑制.进一步观察了P15INK4B对G1/S相关调控蛋白的影响,在M期细胞释放8h(晚G1期细胞)后,与对照组MLC2细胞相比,实验组MLIK6细胞中CyclinD1,CyclinE,Cdk4,C-Myc蛋白水平均降低.相反,P27KIP1的表达却上升.同时探讨了MAPK信号在P15INK4B阻抑A375细胞G1/S转换中的作用与相关性,结果显示晚G1期的MLIK6细胞中ERK1,ERK2水平变化不大,而具有活性的P-ERK1和P-ERK2均表现出下降.上述实验表明,P15INK4B可能通过作用于G1期相关的周期调节蛋白和抑制ERK1和ERK2活性,阻滞G1/S转换与抑制DNA合成.
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