模拟失重大鼠颈总动脉平滑肌细胞溶酶体改变

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目的 研究尾部悬吊模拟失重大鼠颈总动脉(carotid aorta,CA)平滑肌细胞溶酶体数量、分布及相关分子的基因和蛋白表达改变.方法 采用4周尾部悬吊大鼠模拟失重对心血管系统的影响,通过电镜、Western blot技术、免疫组织化学染色和实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测CA平滑肌细胞溶酶体数量和分布、溶酶体相关膜蛋白(lysosomal associated membrane protein,LAMP)1,驱动蛋白kinesin-1,转录因子(transcription factor,TF)EB、TFE3以及溶酶体相关基因的蛋白表达、分布和mRNA水平变化.结果 电镜结果显示,与对照(control,CTR)组相比,悬吊(hindlimb unloading tail suspension,HU)组大鼠CA平滑肌细胞溶酶体数量明显减少;Western blot和免疫组化则显示CA的LAMP1蛋白表达显著降低(P<0.05),且主要为中膜改变(P<0.05),内膜无明显变化;kinesin-1蛋白表达显著增加(P<0.05).qRT-PCR显示,溶酶体相关基因表达显著增加(P<0.05).与CTR相比,TFEB和TFE3蛋白表达在HU大鼠CA中显著降低(P<0.05),基因表达显著增加(P<0.05).结论 HU大鼠CA平滑肌细胞溶酶体数量减少,相关蛋白表达降低,但基因转录水平增加,可能参与动脉重构改变.
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