【摘 要】
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目的 建立一种兔骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)体外分离培养、扩增及鉴定的方法.方法 采用全骨髓贴壁培养法分离rBMSCs并进行体外扩增及纯化,倒置显微镜下观
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科
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目的 建立一种兔骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)体外分离培养、扩增及鉴定的方法.方法 采用全骨髓贴壁培养法分离rBMSCs并进行体外扩增及纯化,倒置显微镜下观察原代及传代细胞的形态、生长情况,绘制细胞生长曲线,取第3代细胞分别向成骨细胞和成脂肪细胞定向诱导,通过染色和电镜检测成骨成脂诱导后变化情况.结果 采用全骨髓贴壁培养法可获得纯度较高的兔骨髓间充质干细胞,原代和传代培养的rBMSCs具有活跃的增殖能力,成骨成脂诱导后,碱性磷酸酶染色、茜素红染色、von Kossa法染色、Ⅰ型胶原免疫细胞化学检测和油红 O染色均呈阳性.成骨诱导电镜检测呈阳性.结论 全骨髓贴壁培养法操作相对简单,可大量分离、纯化、扩增骨髓间充质干细胞,所获细胞具有间充质干细胞的一般生物学特性,经诱导培养后具有多向分化潜能.本实验通过全骨髓贴壁法可以为组织工程提供充足的种子细胞来源.
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