一种提高PCR产物亚克隆效率的方法

来源 :第一军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fuji2009
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利用 PCR扩增目的基因是常用的一种克隆方法,但在实际操作中,试剂盒中Taq DNA聚合酶在经过各种纯化方法(如酚氯仿抽提,乙醇沉淀,电泳和柱纯化)后,仍附着在扩增产物的5’端,有效地阻止随后的内切酶酶切过程,导致重组的失败。作者采用一种可以显著提高?PCR产 However, in practice, the Taq DNA polymerase in the kit is subjected to various purification methods (such as phenol-chloroform extraction, ethanol precipitation, electrophoresis and column purification) Still attached to the 5 ’end of the amplification product, effectively blocking the subsequent endonuclease digestion process, resulting in the failure of recombination. Does the author use a can significantly improve? PCR production
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