透明颤菌血红蛋白基因（vgb）在大肠杆菌中的高效表达

来源 :黑龙江畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shiguanglai

【摘要】

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利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达.重组蛋白在30 ℃诱导获得可溶表达.利用Ni2+亲和层析对重组蛋白进行了纯化,得到

【作者】

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祁艳霞杨明明高文祝发明樊俊华陈玉林

【机构】

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西北农林科技大学,武汉阳光广济医药开发有限公司,湖北工业大学,西北农林科技大学,浙江大学,西北农林科技大学

【出处】

：

黑龙江畜牧兽医

【发表日期】

：

2005年8期

【关键词】

：

透明颠菌血红蛋白基因表达 Vitrvoscilla stercoraeia vgb gene expression

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利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达.重组蛋白在30 ℃诱导获得可溶表达.利用Ni2+亲和层析对重组蛋白进行了纯化,得到重组的透明颤菌血红蛋白,蛋白呈红色.实验现象显示重组蛋白与血红素相结合.紫外光区和可见光区波长扫描分析显示:蛋白粗提物和纯化后的血红蛋白在230 nm和413 nm都有强吸收峰,初步表明,尽管重组蛋白比天然蛋白多36个氨基酸,重组蛋白仍然具有生理活性.诱导后4 h和6 h的培养液氨基乙酰丙酸含量分别达到17 mg/

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