【摘 要】
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β-烟酰胺单核苷酸（NMN）是一种天然存在的维生素B族活性衍生物，具有改善哺乳动物生育能力和肠道功能的作用。以大肠杆菌BW25113为表达宿主，根据NCBI数据库中烟酰胺核糖激酶（NRK）的蛋白序列，同源比对分析合成不同来源的Nrk基因，筛选获得1株高效转化烟酰胺核糖（NR）合成NMN的重组菌株NRK-Gs/BW,在含有50 mmol·L-1 NR和10 mmol·L-1 ATP体系中能够合成43
【机 构】
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福建师范大学生命科学学院/工业微生物发酵技术国家地方联合工程研究中心
【基金项目】
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福建省自然科学基金面上项目（2021J01170）；
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β-烟酰胺单核苷酸（NMN）是一种天然存在的维生素B族活性衍生物，具有改善哺乳动物生育能力和肠道功能的作用。以大肠杆菌BW25113为表达宿主，根据NCBI数据库中烟酰胺核糖激酶（NRK）的蛋白序列，同源比对分析合成不同来源的Nrk基因，筛选获得1株高效转化烟酰胺核糖（NR）合成NMN的重组菌株NRK-Gs/BW,在含有50 mmol·L-1 NR和10 mmol·L-1 ATP体系中能够合成43 mmol·L-1的NMN。进一步引入多聚磷酸激酶（PPK2）构建ATP循环系统，ATP用量降低了80%,反应体系中AMP生成量≤3 mmol·L-1。最后，通过析因设计对反应体系进行优化，在50 mmol·L-1 NR和10 mmol·L-1 ATP的反应体系中，NMN产量为49.96 mmol·L-1,摩尔转化率达到99.96%。通过构建了含有ATP循环系统的NR合成NMN工程菌，大幅度降低了ATP的使用摩尔比，为后续的NMN生产化生产奠定了基础。
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