【摘 要】
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本研究将猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白截去核定位序列(NLS)后对应的dCap基因克隆至pET28a(+)并转入大肠杆菌BL21(DE3),得到重组菌后进行蛋白表达。采用镍离子亲和层析纯化dCap
【机 构】
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湖南农业大学动物医学院,湖南省畜牧兽医研究所,湖南鑫广安农牧股份有限公司
【基金项目】
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湖南省自然科学基金(2019JJ50258),湖南省重点领域研发计划(2019NK2171)。
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本研究将猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白截去核定位序列(NLS)后对应的dCap基因克隆至pET28a(+)并转入大肠杆菌BL21(DE3),得到重组菌后进行蛋白表达。采用镍离子亲和层析纯化dCap蛋白。将纯化的dCap蛋白作为抗原进行包被,建立检测PCV3抗体的间接ELISA方法,并对湖南省1175份临床血清进行检测。结果显示:dCap蛋白主要以包涵体形式表达,当以pH为10.83的碳酸盐缓冲液将纯化的dCap蛋白稀释到0.2μg/mL并进行包被,且血清50倍稀释,酶标二抗1∶8000稀释时,ELI
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