【摘 要】
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目的 探索在非小细胞肺癌细胞中黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)对细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 利用基因沉默技术(siFAK)和FAK抑制剂(PF573228)处理
【机 构】
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中国人民解放军总医院肿瘤中心 北京市
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目的 探索在非小细胞肺癌细胞中黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)对细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 利用基因沉默技术(siFAK)和FAK抑制剂(PF573228)处理A549细胞,Western印迹检测FAK的表达和磷酸化;MTS和集落形成实验检测抑制FAK对细胞生长及集落形成的影响;利用Transwell和划痕实验评估抑制FAK对A549细胞迁移和侵袭的影响;Western印迹检测细胞信号通路分子的表达情况.结果 转染siFAK的细胞FAK和p-FAK表达显著降低,FAK抑制剂(PF573228)能显著抑制FAK的激活.干扰FAK的表达后,可明显抑制非小细胞肺癌细胞A549的迁移和侵袭(P＜0.001);而用FAK抑制剂PF573228抑制FAK的磷酸化后也明显地抑制了细胞的迁移和侵袭(P ＜0.001).干扰和抑制FAK表达后,细胞中p-Src、p-ERK1/2、p-Akt、MMP9和Calpain2的表达都显著下调.结论 通过转染siFAK和FAK抑制剂抑制FAK的激活,都能明显抑制A549细胞生长和集落形成,并显著降低细胞的迁移和侵袭能力.FAK主要通过Src、ERK1/2和Akt信号通路发挥作用,且MMP9和Calpain2可能与FAK介导的肿瘤细胞迁移和侵袭相关.
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