茎环法通用探针定量检测成熟型微RNA方法的建立

来源 :中华生物医学工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangtantan121212
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目的

建立通用型荧光探针用于不同成熟型微RNA的定量检测。

方法

基于茎环法发明者发明且目前应用最为广泛的茎环框架,采用Primer Premier 5.0软件在其茎环框架内部设计了一通用的荧光探针及不同的引物对。采用以上探针和引物对对hsa-miR-143-3p,hsa-miR-145-5p,hsa-miR-124-3p,hsa-miR-339-5p,hsa-miR-361-5p,hsa-miR-423-3p和hsa-miR-486-5p进行定量检测。

结果

结果表明该通用型荧光探针可用于不同成熟型微RNA(hsa-miR-143-3p,hsa-miR-145-5p,hsa-miR-124-3p,hsa-miR-339-5p,hsa-miR-361-5p,hsa-miR-423-3p,hsa-miR-486-5p)的定量检测。

结论

该通用型探针可用于茎环法定量检微RNA,可让定量更加准确、实验成本更低。理论上该探针可以用于所有的成熟型微RNA进行荧光定量PCR检测。

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