水涝胁迫下辣椒转录组特征分析及EST-SSR标记开发

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为开发适当的生物学工具以探索辣椒对水涝胁迫应答的分子机制,该文对不同淹水处理的辣椒样本进行转录组分析,获得了丰富的序列数据,并在此基础上对SSR分子标记进行挖掘。结果表明:(1)辣椒转录组检测共获得128 939条Unigene,其总全长与均长以及GC含量分别是55 082725 bp、1 101 bp和40.57%。与七大功能数据库进行比较,分别有102 123(NR:79.20%)、110 157(NT:85.43%)、70 203(SwissProt:54.45%)、73 539(KOG:57.03%)、77 646(KEGG:60.22%)、77 442(GO:60.06%)以及68 216(Pfam:52.91%)个Unigene获得功能注释。发现脂质代谢、碳水化合物代谢、氨基酸代谢、环境适应、次级代谢物生物合成、信号转导和翻译等途径在辣椒水涝胁迫应答中起重要作用。(2)从辣椒转录组数据中发掘到26 574个SSR位点分布在24 889个Unigene中。SSR的出现频率为20.61%,其中单核苷酸重复所占比例(37.26%)最高,其次是三核苷酸(31.00%)和二核苷酸(25.44%)重复类型,三者占EST-SSR总数的93.70%。在单核苷酸与二核苷酸中最多的基序类型为A/T、AG/CT和TC/GA,然后是AT和TA;三核苷酸中最常见的基序类型是TTG/CAA和ACA/TGT。(3)用Primer 3设计了EST-SSR引物10 002对,随机选择30对引物进行PCR扩增,均可获得有效扩增。通过3份辣椒材料进行扩增,其中7对引物可以扩增出目标条带。综上所述,在辣椒中优势SSR重复类型的基序结构和其他品种基本相近,并初步探索了辣椒水涝胁迫应答的分子机制,开发了EST-SSR标记,为辣椒耐涝遗传育种提供参考。
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