【摘 要】
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目的构建携带人角质细胞生长因子（KGF）基因真核表达载体的减毒沙门氏菌,并进行稳定性检测及体外表达鉴定,为探索制备针对高原急性肺损伤的细胞因子保护剂提供理论和实验依据。
【机 构】
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兰州军区兰州总医院检验科,甘肃农业大学动物医学院
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目的构建携带人角质细胞生长因子（KGF）基因真核表达载体的减毒沙门氏菌,并进行稳定性检测及体外表达鉴定,为探索制备针对高原急性肺损伤的细胞因子保护剂提供理论和实验依据。方法采用RT-PCR法从正常人皮肤组织总RNA扩增出KGF cDNA全长,测序正确后将其定向插入到pcDNA3.0（＋）质粒BamHⅠ和EcoRⅠ之间;以电转化法将构建成功的质粒转化入减毒沙门氏菌Ty21a中,获得重组减毒沙门氏菌菌株TPK,并将其在卡那霉素（＋）和卡那霉素（-）的LB培养板上分别传代培养40代,每隔10代提取质粒进行PCR
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