【摘 要】
：
目的构建含有临床病毒株聚合酶逆转录酶（RT）区的乙肝病毒（HBV）DNA稳定复制细胞系。方法采用巢式PCR从患者血清扩增HBV DNA片段,利用片段置换反应将该片段克隆到HBV DNA复制载体,
【机 构】
：
重庆医科大学重庆市第九人民医院感染科,重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室
【基金项目】
：
国家自然科学基金（81000732）, 重庆市自然科学基金（cstc2011jjA10005）
论文部分内容阅读
目的构建含有临床病毒株聚合酶逆转录酶（RT）区的乙肝病毒（HBV）DNA稳定复制细胞系。方法采用巢式PCR从患者血清扩增HBV DNA片段,利用片段置换反应将该片段克隆到HBV DNA复制载体,并在该载体上引入新霉素抗性基因,在确认该重组DNA体外可复制后,将其转染HepG2细胞,G418筛选,采用real-time PCR结合ELISA及Southern blot检测初筛和鉴定HBV DNA稳定复制细胞系。结果从患者血清扩增出的HBV DNA片段nt55～1654被成功置换到HBV复制质粒pLL相应区域
其他文献
近年来．随着我国国有企业的发展，改革改制的推进及产权制度的建立与完善，形成了一批规模较大，产权关系级次较多的国有企业集团。但由于历史原因，部分国有企业内部管理不善，财务监控
胸壁重建是肿瘤切除术后恢复受损胸壁结构及功能的必要手段。自体皮瓣是软组织重建公认的理想材料,而骨架重建材料的选择尚存一些争议。目前广泛应用的骨架重建材料除了自体
大型少数民族题材电视剧《丝绸之路传奇》在中央电视台综合频道黄金档热播后引起了强烈的反响。作为宣传新疆维吾尔自治区成立60周年来各项事业取得巨大成就的献礼剧,该剧以
娃娃菜是甘肃省乌鞘岭地区高原夏菜的主要栽培品种之一,当地根据海拔高度梯次错期播种,均衡上市,重点弥补了7月下旬到9月上旬东南沿海夏季蔬菜供应缺口。每667m2产值5 000~8
随着计算机技术的日新月异,网络已走进千家万户,而无线网络由于其使用的方便性,更成为网络发展的主流。但是,在实际的应用当中,人们发现安全性已成为无线网络发展必须考虑的
目前我国正处于改革攻坚阶段和转型升级发展的关键时期,迫切需要大量的创新型人才来实现我们的富民强国的使命。因此大学生创就业能力的培养意义重大,本文以互联网+大学生创
目的描述和分析急性白血病患者合并温和气单胞菌感染的临床特点及转归。方法报道北京协和医院1994至2014年收治的2例急性白血病合并温和气单胞菌感染的患者,并通过Pub Med、M
高灵敏、高特异性检测核糖核酸对于疾病的诊断非常关键。目前检测脱氧核糖核酸的方法有荧光法，电化学方法和电致化学发光方法。虽然这些方法能够检测核糖核酸，但是它需要对已知
碘在人体内最主要的生理作用就是合成甲状腺激素，缺乏和过量都可导致严重的甲状腺疾病，其在甲状腺疾病中的作用已引起越来越多的关注，但国内检验领域尚缺乏碘检测的相关平台和技