【摘 要】
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目的:提取小鼠矿化组织中的基质蛋白,用离子交换层析法分离非胶原蛋白,并进行初步分析.方法:取新生小鼠的颅盖骨和成年鼠的股骨,用盐酸胍和EDTA提取基质蛋白,采用Mono Q HR
【机 构】
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武汉大学口腔医学院牙体牙髓科,湖北,武汉,430079;瑞典卡洛林斯卡研究院口腔生物中心
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目的:提取小鼠矿化组织中的基质蛋白,用离子交换层析法分离非胶原蛋白,并进行初步分析.方法:取新生小鼠的颅盖骨和成年鼠的股骨,用盐酸胍和EDTA提取基质蛋白,采用Mono Q HR 离子交换柱层析,4%-16% SDS-PAGE梯度胶电泳,Stains-All染色结合银染鉴定蛋白质,抗骨唾蛋白(bone sialoprotein,BSP)抗体,抗骨桥素(osteopontin,OPN)抗体进行免疫印迹.结果:用Mono Q HR 离子交换柱能够有效地分离出矿化组织的非胶原蛋白,Stains-All硝酸银染色和免疫印迹显示出不同组份的蛋白质提取分析情况.结论:对矿化组织中的非胶原蛋白的初步提取、分离可以采用Mono Q HR 离子交换柱层析,采用银染结合Stains-All染色、免疫印迹检测和鉴定各种非胶原蛋白.
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