前列腺特异膜抗原基因的表达

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目的 克隆前列腺特异膜抗原(PSMA)基因的编码区序列,构建PSMA真核表达载体.方法 用RT-PCR方法扩增前列腺癌组织标本中的PSMA cDNA序列,并将其克隆至真核表达载体PcDNA3.0.用脂质体转染法,把pcDNA3.0-PSMA转染哺乳动物细胞,鉴定PSMA蛋白的表达.结果 两条引物之间的片断长度为2 279 bp,与预期长度一致.将克隆的编码区序列与Genebank的PSMA序列同源性为99.7%;表达的蛋白质为膜蛋白,免疫印迹表明表达蛋白质的相对分子质量为100 kD.结论 扩增PSMA编码区序列.可构建PSMA真核表达载体,建立PSMA稳定表达的细胞株.PSMA具有良好的抗原性。

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