【摘 要】
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目的:鼠抗人OX40L分子功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定.方法:以高表达人OX40L分子的基因转染细胞L929/OX40L为免疫原, 常规免疫BALB/c小鼠, 采用B淋巴细胞
【机 构】
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苏州大学生命科学学院生物技术研究所,苏州大学附属第一人民医院肿瘤科
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目的:鼠抗人OX40L分子功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定.方法:以高表达人OX40L分子的基因转染细胞L929/OX40L为免疫原, 常规免疫BALB/c小鼠, 采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合, 经流式细胞术(FCM)分析和多次克隆化培养, 筛选出特异分泌鼠抗人OX40L分子mAb的杂交瘤细胞株;采用Western blot、 Ig亚型快速定性试纸法、染色体核型分析、竞争结合抑制试验、间接免疫荧光法和MTT增殖试验等对单抗的生物学特性进行鉴定.结果:获得2株持续、稳定分泌鼠抗人OX40LmAb的杂交瘤细胞株, 分别命名为4D6和5C2.对mAb生物学功能的研究结果表明, 2株mAb均能识别成熟DC细胞以及Jurkat、 SHI-1、 U937等白血病细胞株表面的OX40L分子.对其中SHI-1白血病细胞株增殖影响的实验显示, 这2株抗体对SHI-1的增殖都具有一定的抑制作用.结论:成功地获得了2株鼠抗人OX40L功能性mAb杂交瘤, 其所分泌的抗体能特异地识别人OX40L分子, 并影响表达OX40白血病细胞株的体外增殖, 为进一步研究OX40/OX40L的生物学功能奠定了基础.
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