IL-10基因克隆化与原核重组IL-10蛋白制备的实验研究

来源 :实用医药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zml19881209

【摘要】

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目的克隆化人IL-10基因及重组蛋白的制备为IL-10基因表达在小儿炎症性、过敏性疾病中的作用及治疗等提供有力的证据.方法采用过敏症患者发作时期的外周血,提取总RNA.以总RNA

【作者】

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濮海平刘华刘相萍隋爱华杨堃吕振华

【机构】

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401医院儿科,青岛大学医学院附属医院中心实验室

【出处】

：

实用医药杂志

【发表日期】

：

2004年12期

【关键词】

：

IL-10 原核重组蛋白基因克隆化临床应用治疗 RT-PCR 总RNA 诱导表达 PCR产物 CytokinesIL-10Cloning of Gene

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目的克隆化人IL-10基因及重组蛋白的制备为IL-10基因表达在小儿炎症性、过敏性疾病中的作用及治疗等提供有力的证据.方法采用过敏症患者发作时期的外周血,提取总RNA.以总RNA为模板,特异性引物进行反转录,RT-PCR进行IL-10基因筛选.PCR产物经酶切分析和DNA序列测定后,构建重组质粒pTrchHis2B-hIL10原核高效表达载体,通过大肠杆菌(工程菌)JM109经IPTG诱导表达重组hIL-10蛋白,并经与Ni-NTA树脂中的6×His配体结合进行亲和层析纯化,表达产物进行SDSP

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