【摘 要】
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目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)中RIP140的表达对肝癌细胞侵袭、增殖的影响。方法慢病毒介导小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)RIP140的过表达,Western blot和Real-time PCR(q RT-PCR)
【机 构】
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重庆医科大学第二附属医院肝胆外科,四川大学华西医院肿瘤中心
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目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)中RIP140的表达对肝癌细胞侵袭、增殖的影响。方法慢病毒介导小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)RIP140的过表达,Western blot和Real-time PCR(q RT-PCR)分别检测PMs中RIP140蛋白以及核酸表达水平,流式细胞仪分析慢病毒转染率;Western blot、细胞免疫荧光和q RT-PCR检测肝癌条件培养基(HCM)刺激PMs后TAMs中RIP140的表达变化;HCM刺激PMs以及HCM刺激过表达RIP140的PMs,q RT-PCR检测TAMs极化指标以及NF-κB和IL-6的表达;Transwell实验和细胞流式凋亡实验检测肝癌细胞的侵袭和凋亡;肝癌细胞和PMs以4∶1比例注射于BALB/c裸鼠皮下,建立裸鼠皮下肝癌模型,成瘤癌组织HE染色和免疫组化评定肝癌组织大体生长情况和肝癌细胞增殖能力。结果慢病毒介导PMs RIP140的过表达,病毒转染效率高,RIP140过表达明显;HCM刺激PMs后,TAMs中RIP140呈低表达;HCM诱导TAMs呈M2型极化,并且与肿瘤生长密切相关的NF-κB-IL-6轴处于活化状态;TAMs可促进肝癌细胞侵袭和增殖,抑制肝癌细胞凋亡。TAMs过表达RIP140可抑制HCM介导的TAMs M2型极化并抑制NF-κB/IL-6通路的激活,减少IL-6的释放;除此之外,TAMs过表达RIP140可抑制肝癌细胞的侵袭和增殖,促进肝癌细胞的凋亡。结论过表达RIP140的TAMs可抑制肝癌细胞的侵袭和增殖。其机制可能与TAMs过表达RIP140后抑制TAMs M2型极化有关。
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