补体C3基因敲除对四氯化碳致小鼠肝损伤及纤维化的作用

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mqj1965
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目的

观察补体C3基因敲除对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠肝损伤及肝纤维化的影响。

方法

通过腹腔注射CCl4对野生小鼠及C3基因敲除鼠进行造模,实验组每周腹腔注射两次2%CCl4玉米油溶液,每次5 ml/kg,对照组给予相同频率及剂量的玉米油溶液腹腔注射。实验使用随机数字表法将小鼠随机分为4组:野生小鼠对照组(WT-sham),C3基因敲除鼠对照组(C3-/--sham),野生小鼠实验组(WT-CCl4),C3基因敲除鼠实验组(C3-/--CCl4)。造模4周后处死小鼠,收取其肝组织及血清样本,通过肝功能检测、原位缺口末端标记法(TUNEL)荧光染色、免疫组织化学、定量聚合酶链反应(PCR)等实验方法对样本进行检测,分析各组之间肝损伤、细胞凋亡、肝纤维化、炎症水平等指标的差异。两组之间差异性统计用双尾t检验进行分析。

结果

WT-CCl4组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)显著高于C3-/--CCl4组[ALT:(53.5±3.7) U/L比(32.8±3.1) U/L,P<0.01;AST:(170.3±16.2) U/L比(123.3±7.1) U/L,P<0.05]。同时,WT-CCl4组细胞凋亡水平、氧化应激相关产物髓过氧化物酶(MPO)、3-氯酪氨酸水平显著高于C3-/--CCl4组(细胞凋亡:30.0±3.0比17.0±2.6,P<0.05;MPO:3.3±0.2比1.8±0.3,P<0.01;3-氯酪氨酸:3.8±0.8比1.7±0.3,P<0.01)。WT-CCl4组肝组织天狼星红染色水平、Ⅰ型胶原及平滑肌肌动蛋白生成水平显著高于C3-/--CCl4组(天狼星红染色:4.3±0.3比2.0±0.5,P<0.05;Ⅰ型胶原:4.7±0.7比2.3±0.3,P<0.05;平滑肌肌动蛋白:4.6±0.6比2.3±0.3,P<0.05)。WT-CCl4组肝组织肿瘤坏死因子、白细胞介素(IL)-6及IL-1的RNA表达水平与巨噬细胞浸润水平显著高于C3-/--CCl4组(肿瘤坏死因子:4.2±0.6比2.3±0.3,P<0.05;IL-6:3.0±0.3比1.6±0.2,P<0.01;IL-1:3.2±0.1比2.0±0.3,P<0.05;巨噬细胞浸润水平:5.3±0.6比2.6±0.7,P<0.05)。

结论

C3基因敲除可显著减轻CCl4诱导的小鼠肝损伤及肝纤维化水平。

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