间接免疫荧光试验(IIF)检测PRRSV方法的应用

来源 :上海畜牧兽医通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jshaczcl
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用PRRSV ATCC VR-2332株人工单独感染了3头3周龄仔猪,并用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染了2头3周龄仔猪,同时设立了3头健康对照猪.攻毒后每日记录试验猪体温、采食、临床表现等,并用HerdChek IDEXX Kit测其血清抗体.PRRSV+PCV2联合感染猪分别在感染后1周、3周剖杀,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1周、2周和3周剖杀.对肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞(PAM),用PAM进行抹片,同时用肺组织直接进行触片作IIF检测.IIF试验结果表明,用所获得的3株单抗均检测到了人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原.另外,用IIF检测临床疑似PRRS的7头猪的PAM抹片,其中沭阳2头猪呈现阳性反应.对这2头猪的肺组织进行病毒分离,结果在盲传到第四代时在Marc-145细胞上产生明显的细胞病变,进一步证实了所获得的3株单抗检测临床样品的准确性和可靠性.综合以上试验结果,证实了所获得的3株单抗均可通过IIF试验用于临床检测肺组织中的PRRSV抗原.
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