部分还原和分步序列测定法定位虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ二硫键

来源 :高等学校化学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gsdx2009
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结合部分还原和分步序列测定法确定了虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ的二硫键配对方式. 在pH=3和40 ℃的条件下与还原剂三羧甲基磷酸(TCEP)反应10 min, 利用RP-HPLC分离并分别收集含有一对和两对二硫键被还原的中间体, 分别与0.5 mol/L碘乙酰胺溶液(pH=8.3)反应1 min, 使游离巯基烷基化后, 测定各中间体的氨基酸序列, 从而确定虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ的3对二硫键分别为Cys 2-Cys 17, Cys 9-Cys 24和 Cys-Cys 31(1-4, 2-5和3-6).
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