【摘 要】
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目的探讨肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)与人卵巢癌顺铂耐药细胞A2780/DDP顺铂耐药表型的关系及其分子机制。方法应用LipofectamineTM介导反义寡核苷酸(AsODN)体外
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,三峡大学第一临床医学院宜昌中心人民医院妇产科,华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,首都医科大学附属北京妇产医院计划生育科,华中科技大学同济医学院附属同济
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目的探讨肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)与人卵巢癌顺铂耐药细胞A2780/DDP顺铂耐药表型的关系及其分子机制。方法应用LipofectamineTM介导反义寡核苷酸(AsODN)体外转染人卵巢癌细胞;采用RT-PCR和Western blot法检测转染前后细胞中LRP基因的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测顺铂对转染前后细胞的杀伤效应;通过高效液相色谱仪(HPLC)检测经LRP AsODN或抗LRP单克隆抗体作用后,顺铂在A2780/DDP细胞质、核中的吸收和排泄情况。结果与非耐药亲本细胞A2780相比,A2780/DDP细胞内LRP表达明显增高。LRP AsODN能明显降低A2780/DDP细胞中LRP表达水平,逆转其顺铂耐药表型。经LRP AsODN或抗-LRP单克隆抗体作用后,A2780/DDP细胞中顺铂含量明显增高,尤以胞核中的含量上升为甚,而其从核中的排泄受到显著性抑制。结论LRP可能参与介导人卵巢癌细胞顺铂耐药表型的产生,并可能与顺铂在卵巢癌细胞胞质囊泡以及细胞核质交换中的代谢过程密切相关。
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