【摘 要】
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目的:考察罗哌卡因是否通过微小RNA-143(miR-143)调控胃癌细胞的增殖和凋亡.方法:噻唑蓝(MTT)检测25、50、100 μ g/mL罗哌卡因作用于胃癌细胞HS-746T后的细胞增殖情况,免疫印迹试验(Western blot)检测细胞核相关抗原(Ki-67)蛋白的表达.流式细胞仪检测HS-746T细胞凋亡,Western blot检测活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 (Cleaved-caspase-3)蛋白的表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-143的表达.在HS-
【机 构】
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郑州大学第五附属医院麻醉科 河南 郑州 450052
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目的:考察罗哌卡因是否通过微小RNA-143(miR-143)调控胃癌细胞的增殖和凋亡.方法:噻唑蓝(MTT)检测25、50、100 μ g/mL罗哌卡因作用于胃癌细胞HS-746T后的细胞增殖情况,免疫印迹试验(Western blot)检测细胞核相关抗原(Ki-67)蛋白的表达.流式细胞仪检测HS-746T细胞凋亡,Western blot检测活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 (Cleaved-caspase-3)蛋白的表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-143的表达.在HS-746T细胞中转染miR-143 mimics/inhibitor;另使用罗哌卡因处理转染miR-143 inhibitor的细胞,采用MTT、流式细胞仪、Western blot检测细胞的增殖、凋亡与Ki67、Cleaved-caspase-3的表达情况.结果:罗哌卡因明显抑制HS-746T细胞的增殖和Ki67蛋白的表达,且抑制作用随浓度增加而逐渐提高(P＜0.05);100 μ g/mL罗哌卡因显著促进细胞凋亡、Cleaved-caspase-3蛋白表达和miR-143表达(P＜0.05).转染miR-143 mimics明显降低HS-746T细胞的增殖和Ki67蛋白的表达,而显著提高细胞凋亡和Cleaved-caspase-3的蛋白表达(P＜0.05);转染miR-143 inhibitor的HS-746T细胞变化与转染miR-143 mimics的结果相反.转染miR-143 inhibitor后,罗哌卡因对HS-746T细胞增殖、Ki67蛋白表达的抑制被逆转,其对细胞凋亡、Cleaved-caspase-3蛋白表达的促进也被逆转(P＜0.05).结论:罗哌卡因通过上调胃癌细胞中miR-143的表达,抑制细胞增殖和诱导凋亡.
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