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目的
观察慢病毒载体（lentiviral vector）介导的脑啡肽酶（Lenti-脑啡肽酶）基因对小鼠神经干细胞（NSC）转导及其表达的情况。
方法利用Lenti-脑啡肽酶基因载体体外转导小鼠原代NSC，细胞免疫荧光染色和蛋白质印迹法分析NSC的蛋白表达，酶联免疫吸附试验和高效液相色谱法检测NSC中脑啡肽酶蛋白对β-淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）的体外降解效率，不同组别之间差异比较采用t检验。
结果Lenti-绿色荧光蛋白转导NSC后96 h的成功转导率达90%以上。NSC转导脑啡肽酶基因后可同时表达脑啡肽酶和NSC的标记抗体Nestin或神经元的标记抗体微管相关蛋白2。随着细胞脑啡肽酶膜蛋白的浓度增加或孵育时间延长，脑啡肽酶降解Aβ1-40活性也增强。2.5 μg (21.00±2.51) 及1.0 μg (15.00±0.54) 脑啡肽酶蛋白降解活性较0.5 μg (8.00±0.81) 显著提高 (t=40.4、12.7，均P<0.01)，phosphoramidon则明显抑制脑啡肽酶活性 (0.5 μg:0.08±0.01;1.0 μg: 0.04±0.01;2.5 μg:0.05±0.01，与相等脑啡肽酶浓度比较，t=17.2、51.3和14.1，均P<0.01) 。孵育1、4和12 h的脑啡肽酶降解率分别为11.4%、28.4%和93.7%。
结论Lenti-脑啡肽酶基因可于体外成功转导小鼠NSC，移植脑啡肽酶基因转染的NSC具有潜在的治疗前景。