通过质粒电穿孔法、腺病毒转染法(rAd)和9型腺相关病毒转染法(rAVV9)转染Gα_i2羧基末端肽(Gα_i2ctp)基因至乳鼠心肌细胞，比较不同方法的转染效率、心肌毒性以及对胆碱类药物迷走神经效应的拮抗作用，探寻Gα_i2ctp基因功能表达的最佳转导途径。

构建重组质粒pDC316-Gα_i2ctp-mCMV-EGFP(质粒电穿孔组)、重组腺病毒rAd-Gα_i2ctp-mCMV-EGFP(rAd组)和重组9型腺相关病毒rAAV9-Gα_i2ctp-IRES-EGFP(rAAV9组)以及未携带Gα_i2ctp基因的空白对照组(n＝10)。3种方法转染携带免疫荧光蛋白(EGFP)的Gα_i2ctp目的基因至乳鼠心肌细胞，探寻最佳电转导参数和病毒最佳感染复数(MOI)；比较最佳参数下不同方法转染情况和最大效率；AlamarBlue法测定各时间点还原比率评估心肌毒性；Western-blot法检测Gα_i2ctp蛋白表达情况。最后以最适浓度的卡巴胆碱干预各组细胞，通过计数细胞整体搏动频率比较3种方法下Gα_i2ctp基因的抗迷走神经效应差异。

3种方法最佳参数设置下Gα_i2ctp-EGFP蛋白均成功表达且差异无统计学意义，转染效率分别于2、1.5、4 d达最高(54.2%±4.8%、100%和59.2%±4.4%)，于第11 d转染效率分别为(30.1%±6.6%、12.0%±3.4%和36.0%±6.1%)；rAAV9组在全观察期11 d内细胞活性接近空白对照组(P>0.05)，质粒电穿孔组和rAd组细胞活性于3 d后开始明显下降且后者较显著(P<0.05)。卡巴胆碱以最佳药效浓度200 μg/ml干预培养3 d后心肌细胞，发现Gα_i2ctp基因组较无基因组具有明显的抗卡巴胆碱迷走神经效应(P<0.05)，但各方法之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。

质粒电穿孔法转染方式迅速、转染效率尚可，但对细胞破坏力大；rAd法转染效率最高可达100%，但表达持续时间较短，心肌毒性较大；rAAV9法转染起效较慢但能够稳定地长时间表达且生物安全性最好。3种方法皆可有效表达Gα_i2ctp并发挥拮抗卡巴胆碱迷走神经变时效应。该实验为Gα_i2ctp转染治疗心房颤动提供了理论支持和方法学依据。