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葡萄芪合酶基因cDNA片段酵母表达载体的构建及其在酿酒酵母中的表达

来源 :西北农林科技大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dswlbwb1

【摘 要】

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应用基因重组技术，将从华东葡萄白河-35-1中分离出的长1179bp芪合酶（stilbenesynthase，STS）基因的eDNA片段克隆人大肠杆菌～酵母菌穿梭型诱导表达载体pYES6／CT上，构建重组酵母真核表

【作 者】

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刘林丽 王跃进 

【机 构】

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西北农林科技大学生命科学学院,西北农林科技大学园艺学院

【出 处】

：

西北农林科技大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2007年12期

【关键词】

：

芪合酶 酵母表达载体 载体构建 诱导表达 stilbene synt hase  yeast expression vector   vector constr 

【基金项目】

：

国家科技部转基因专项（JY03-A-19-02）,西北农林科技大学科研专项（JY-A-19-02）

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应用基因重组技术，将从华东葡萄白河-35-1中分离出的长1179bp芪合酶（stilbenesynthase，STS）基因的eDNA片段克隆人大肠杆菌～酵母菌穿梭型诱导表达载体pYES6／CT上，构建重组酵母真核表达质粒pYES6／CT～STS，转化酿酒酵母菌株INVScl，用B1asticidin（bsd）筛选出阳性克隆转化子，经半乳糖诱导表达后进行5个时间段菌体全蛋白SDS-PAGE电泳和Western-blot分析。结果发现，诱导4h后开始有目标带（48ku）出现，诱导16h开始大量且稳定表达。证明

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