【摘 要】
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目的研究蛇床子素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响，并探讨其调节CNE2细胞上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法体外培养CNE2细胞，以0、20、40、80 μg/ml蛇床子素分别处理CNE2细胞24、48 h后，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、Transwell实验分别检测其对细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响，以0 μg/ml蛇床子素处理组为对照组。反转录-聚合酶链反应(RT-PC
【机 构】
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515041 汕头大学医学院附属肿瘤医院肿瘤研究实验室,515041 汕头大学医学院附属肿瘤医院肿瘤研究实验室,515041 汕头大学医学院附属肿瘤医院检验科,515041 汕头大学医学院附属肿瘤医院
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目的研究蛇床子素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响，并探讨其调节CNE2细胞上皮间质转化(EMT)的分子机制。
方法体外培养CNE2细胞，以0、20、40、80 μg/ml蛇床子素分别处理CNE2细胞24、48 h后，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、Transwell实验分别检测其对细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响，以0 μg/ml蛇床子素处理组为对照组。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting方法分别检测EMT标志物上皮钙黏着蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)及Wnt/β-catenin信号通路组分β-catenin、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的转录和蛋白表达水平。
结果作用24 h和48 h后，0、20、40、80 μg/ml蛇床子素处理组细胞增殖抑制率分别为0.00%±0.00%、7.45%±0.87%、14.12%±2.29%、27.26%±0.43%和0.00%±0.00%、13.44%±0.84%、29.03%±0.78%、57.49%±1.70%，差异均有统计学意义(F＝174.33，P<0.001；F＝1 041.40，P<0.001)，进一步两两比较，差异均具有统计学意义(均P<0.01)。采用不同浓度的蛇床子素(0、20、40、80 μg/ml)处理CNE2细胞48 h后，细胞迁移细胞数分别为52.13±4.49、29.00±4.49、18.50±1.93、13.75±2.77，差异有统计学意义(F＝200.37，P<0.001)，进一步两两比较，差异均具有统计学意义(均P<0.01)。采用不同浓度的蛇床子素(0、20、40、80 μg/ml)处理CNE2细胞48 h后，细胞侵袭数分别为46.63±2.87、24.13±2.87、16.75±5.29、11.00±1.77，差异有统计学意义(F＝131.92，P<0.001)，进一步两两比较，差异均具有统计学意义(均P<0.01)。采用不同浓度的蛇床子素(0、20、40、80 μg/ml)作用于人鼻咽癌CNE2细胞48 h后，E-cadherin mRNA(1.00±0.13、2.61±0.03、3.12±0.09、3.60±0.06；F＝20.92，P<0.001)和E-cadherin蛋白表达(0.22±0.03、0.35±0.01、0.60±0.04、0.82±0.03；F＝178.63，P<0.001)差异有统计学意义，进一步两两比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。同时，采用不同浓度蛇床子素(0、20、40、80 μg/ml)处理CNE2细胞48 h后，vimentin的mRNA表达(1.00±0.12、0.68±0.03、0.56±0.01、0.40±0.09；F＝9.48，P<0.010)、β-catenin的mRNA表达(1.00±0.14、0.78±0.04、0.69±0.07、0.46±0.12；F＝4.84，P<0.050)和cyclin D1的mRNA表达(1.00±0.09、0.82±0.03、0.58±0.09、0.40±0.03；F＝9.49，P<0.010)差异均有统计学意义，各组间进一步两两比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)；vimentin的蛋白表达(0.85±0.02、0.74±0.01、0.34±0.01、0.27±0.01；F＝610.58，P<0.001)、β-catenin的蛋白表达(0.83±0.00、0.44±0.02、0.39±0.00、0.23±0.03；F＝985.74，P<0.001)、cyclin D1的蛋白表达(0.86±0.02、0.67±0.00、0.35±0.01、0.25±0.01；F＝910.57，P<0.001)差异均有统计学意义，各组间进一步两两比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论蛇床子素可抑制CNE2细胞的增殖、侵袭和迁移，其机制可能与调节Wnt/β-catenin信号通路进而抑制EMT过程有关。
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