芦荟苷通过降低热休克蛋白70的表达增强顺铂诱导的胃癌细胞凋亡

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shulili1987
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目的:探讨芦荟苷能否通过降低热休克蛋白70(HSP70)的表达,增强顺铂诱导的胃癌细胞凋亡。方法:胃癌HGC-27细胞分为对照组、200 mg/L芦荟苷组、5 mg/L顺铂组和两者联合组(200 mg/L芦荟苷+5 mg/L顺铂)。DAPI染色和流式细胞术分别检测细胞凋亡形态改变及凋亡率;RT-qPCR检测HSP70 mRNA的表达水平;Western blot检测HSP70和凋亡相关蛋白的表达;免疫沉淀(IP)检测HSP70的泛素化水平。结果:DAPI染色结果显示,与药物单独刺激组相比,联合组细胞核浓缩与核碎裂现象显著增强。流式细胞术分析细胞凋亡率表明,顺铂组细胞凋亡率为16.71%,显著高于对照组的6.95%(P<0.01)。虽然芦荟苷组与对照组相比,凋亡率无显著差异,但是其与顺铂联合作用后,细胞凋亡率为33.74%,显著高于顺铂和芦荟苷单独刺激组(P<0.01)。RT-qPCR显示,芦荟苷能够显著下调顺铂诱导的HSP70 mRNA表达(P<0.01)。Western blot结果表明,联合组cleaved PARP和cleaved caspase-3/-7的表达均高于单独作用组(P<0.05或P<0.01),pro-caspase-3的水平则呈现出相反的变化(P<0.01);芦荟苷组与联合组HSP70的蛋白表达与对照组相比显著下降(P<0.01),而顺铂组其表达则无显著变化。IP结果显示,顺铂可诱导HSP70泛素化,但芦荟苷对HSP70的泛素化水平并无显著影响。结论:芦荟苷通过降低HSP70的表达,增强顺铂诱导的胃癌细胞凋亡。
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