【摘 要】
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目的：构建A型流感病毒核蛋白（NP）的原核表达质粒,分析其在大肠杆菌中的表达状况。方法：采用逆转录聚合酶链式反应技术从A型流感病毒基因组中扩增出编码核蛋白的基因片段,克隆至pG
【机 构】
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河南中医学院基础医学院病原与免疫学科,郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室
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目的：构建A型流感病毒核蛋白（NP）的原核表达质粒,分析其在大肠杆菌中的表达状况。方法：采用逆转录聚合酶链式反应技术从A型流感病毒基因组中扩增出编码核蛋白的基因片段,克隆至pGEM-TEasy载体,PCR筛选阳性克隆并测序。经酶切后将目的片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL2（CDE3）,PCR和酶切鉴定转化菌落。将阳性菌落经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹分析目的蛋白的表达。结果：RT-PCR扩增出NP基因序列,将其亚克隆至表
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