基于脯氨酸理论提高枯草芽孢杆菌脂肪酶A的热稳定性

来源 :化学与生物工程 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hmxj1977
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以枯草芽孢杆菌脂肪酶A(LipA)为研究对象,根据从RCSB数据库中获取的晶体结构,采用分子动力学模拟和分子生物学实验相结合的方法进行脂肪酶热稳定性位点突变的理性设计。首先,利用分子动力学模拟获得晶体结构中柔性较高的Loop区域;进而,结合"脯氨酸理论",将位于该区域附近的Gly残基突变为Pro,分析引入Pro突变对LipA热稳定性的影响,筛选得到Gly52和Gly158两个突变位点;最后,通过定点突变操作对突变株LipA^G52P和LipA^G158P进行热稳定性实验验证。结果显示,突变株LipA^G5
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