地高辛标记的cRNA探针在胰岛素mRNA原位分子杂交中的应用

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采用雄性成年Wistar大鼠胰腺,用地高辛标记的cRNA探针进行原位分子杂交,以检测胰岛B细胞的胰岛素基因表达产物mRNA;同时用免疫组织化学PAP法显示相邻切片胰岛素免疫反应阳性细胞,进行原位比较。1.标本制备:大鼠经4%多聚甲醛灌流固定,取胰尾,入Bouin液固定20h,常规石蜡包埋,切片厚6μm,裱在用铬矾明胶处理的载片上。2.探针标记:用RNA标记试剂盒(Boehringer Mannheim Male Wistar rats were used for in situ hybridization with digoxigenin-labeled cRNA probe to detect mRNA expression of islet B mRNA in pancreatic islets. Immunohistochemical PAP method was used to detect the expression of adjacent immunoreactive cells , Compared in situ. 1. Specimen preparation: Rats were perfused with 4% paraformaldehyde and fixed in the tail of the pancreas. The solution was fixed in Bouin solution for 20h, embedded in paraffin and sliced ​​to a thickness of 6μm, mounted on slides treated with chrome alum gelatin. 2. Probe Labeling: The RNA labeling kit (Boehringer Mannheim
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