【摘 要】
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目的:检测糖尿病患者外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)黏附功能及其DNA的羟甲基化水平,并探讨DNA羟甲基化水平与糖尿病血管并发症患者EPCs功能的关系.方
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院内分泌科,湖北武汉 430014
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目的:检测糖尿病患者外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)黏附功能及其DNA的羟甲基化水平,并探讨DNA羟甲基化水平与糖尿病血管并发症患者EPCs功能的关系.方法:采用梯度离心法分离30例健康志愿者(正常对照组)和30例2型糖尿病伴有血管并发症患者(糖尿病组)的外周血单个核细胞,并利用EBM-2培养基将其诱导分化为EPCs.检测细胞黏附纤维蛋白的能力判断EPCs的功能是否异常.采用DNA提取试剂盒提取EPCs DNA,通过液相色谱-串联质谱分析法测定5-羟甲基胞嘧咬(5hmC)和5-甲基胞嘧啶(5mC)含量,判断EPCs DNA的羟甲基化水平.结果:与正常对照组相比,糖尿病组EPCs的黏附能力显著下降(P＜0.05);EPCs DNA的羟甲基化修饰水平明显提高;5hmC和5mC含量显著下降(P＜0.01及P＜0.05),两者的比值明显降低(P＜0.05).结论:糖尿病伴血管并发症患者的外周血EPCs功能显著下降,可能与DNA羟甲基化修饰有关,提示DNA羟甲基化修饰导致EPCs功能下降可能是糖尿病血管并发症发生的重要机制.
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