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目的:真核表达人自身抗原细胞色素P4502D6(CYP2D6)显性表位285bp基因片段,获得具免疫学活性的纯化重组蛋白,为自身免疫性肝炎抗体的检测提供特异性抗原.方法:以肝脏的cDNA混合文库为模板作PCR,将PCR产物与真核表达载体pEGH共同转化酿酒酵母Y258,碱裂解法进行质粒制备,PCR扩增鉴定.表达载体构建成功后,在半乳糖的诱导下表达产生重组融合蛋白,利用GST亲和层析法进行纯化.然后对其产物进行十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)和蛋白质印迹法(WB)及蛋白质质谱学rMAL