H7亚型禽流感病毒HA基因在杆状病毒系统中的表达

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mzybbs

【摘要】

：

利用PCR反应，以特异性引物扩增禽流感病毒去除信号肽的H7亚型HA密码子优化基因，克隆到杆状病毒转移载体pFastBac-HTB中，转座DH10感受态细胞，通过蓝白斑筛选、PCR鉴定获得阳性克隆

【作者】

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郝婧邓国华姜永萍曲站红王桂芹郝永清陈化兰

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室／兽医生物技术国家重点实验室,内蒙古农业大学动物科学与医学学院

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2007年4期

【关键词】

：

禽流感 H7亚型 HA基因重组杆状病毒 avian influenza H7 subtype HA gene recombinant baculovir

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利用PCR反应，以特异性引物扩增禽流感病毒去除信号肽的H7亚型HA密码子优化基因，克隆到杆状病毒转移载体pFastBac-HTB中，转座DH10感受态细胞，通过蓝白斑筛选、PCR鉴定获得阳性克隆，然后提取基因组Bacmid，转染Sf9昆虫细胞，得到含H7亚型流感病毒HA基因的重组杆状病毒opti-H7HA-Bac。重组杆状病毒接种Sf9昆虫细胞，待绝大部分细胞产生细胞病变后收获细胞，细胞裂解产物经血凝试验、SDS-PAGE及Western blot分析证实，密码子优化的H7HA基因在重组杆状病毒opti-

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