【摘 要】
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目的探讨输尿管细胞外基质(ECM)的制备方法.方法采用正交设计方法[L9(34)].取19只兔的输尿管19条,其中9条被分成27段,按正交设计随机分为9组行脱细胞处理.所有试验重复3次.经脱细胞处理后,采用苏木素-伊红(HE)染色及计算机图像分析对基质进行残余细胞成分计数,统计分析获得最佳方法(A3B2C3).另10条输尿管采用最佳方法制备成输尿管ECM并用于输尿管缺损修复实验,分别于修复术后1、
【机 构】
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430060,武汉大学人民医院泌尿外科
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目的探讨输尿管细胞外基质(ECM)的制备方法.方法采用正交设计方法[L9(34)].取19只兔的输尿管19条,其中9条被分成27段,按正交设计随机分为9组行脱细胞处理.所有试验重复3次.经脱细胞处理后,采用苏木素-伊红(HE)染色及计算机图像分析对基质进行残余细胞成分计数,统计分析获得最佳方法(A3B2C3).另10条输尿管采用最佳方法制备成输尿管ECM并用于输尿管缺损修复实验,分别于修复术后1、4及16周取材分析缺损修复处组织再生情况.结果各组脱细胞后残余细胞成分量均不相同,但第7、9组均未发现细胞残余成分;采用最佳方案制备的输尿管ECM经扫描电镜分析未发现细胞残片.缺损修复实验后1周移行上皮组织爬满基质内表面;术后4周可见基质内细胞成分明显增多,但较正常组织稀疏,排列不规则;16周,取材的组织学分析表明细胞外基质替代部分组织再生状况良好.结论制备输尿管细胞外基质的最佳方案是A3B2C3,即在输尿管脱细胞处理过程中采用0.4%胰蛋白酶、1.0%甲醛+0.2%戊二醛、40U/ml DNase.
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