【摘 要】
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目的：观察香烟烟雾提取物(CSE)对 CD4+ T 细胞向 Th17细胞和调节性 T 细胞分化的影响,为探索香烟烟雾暴露导致气道慢性炎症的机制提供实验依据。方法采用免疫磁珠法分离纯化健
【机 构】
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首都医科大学附属北京同仁医院呼吸科,首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所
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目的：观察香烟烟雾提取物(CSE)对 CD4+ T 细胞向 Th17细胞和调节性 T 细胞分化的影响,为探索香烟烟雾暴露导致气道慢性炎症的机制提供实验依据。方法采用免疫磁珠法分离纯化健康志愿者外周血 CD4+ T 细胞,以1×106/ml 细胞密度接种于96孔培养板,分为以下8个组①空白对照组；②T 细胞刺激剂组：加入 T 细胞刺激剂抗人 CD3/28抗体微磁珠；③T 细胞刺激剂 CSE 干预组：CD3/28+2%CSE；④细胞因子组：CD3/28+细胞因子；⑤细胞因子 CSE 干预组：CD3/28+细胞因子+2%CSE；⑥芳香烃受体(AHR)激动剂6-甲酰基吲哚[3,2-b]咔唑(FICZ)组 CD3/28+细胞因子+FICZ；⑦AHR 拮抗剂白藜芦醇组：CD3/28+细胞因子+2%CSE+白藜芦醇；⑧溶剂对照组：CD3/28+细胞因子+DMSO。细胞因子为含 TGF-β/IL-1β/IL-6/IL-23的混合细胞因子,以诱导 Th17细胞和调节性 T 细胞分化。培养5 d 后,收集细胞,采用流式细胞术检测细胞表面分子 CD4+ CD25+ Foxp3+细胞(Treg 细胞),以及胞内细胞因子 IL-17+的 CD4+ T 细胞(Th17细胞),计算各种刺激培养条件下,诱导生成的Th17及 Treg 细胞占 CD4+ T 细胞的百分比。结果①CSE 对 Th17细胞分化的影响：空白对照组 Th17细胞比例为(0.69±0.12)%,加入 T 细胞刺激剂后为(1.32±0.12)%,在此基础上加入 CSE 的干预组IL-17+细胞比例升高为(2.17±0.24)%,(t =3.21,P
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